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  • 蛋白酶K的使用方法

    2019-05-20 蛋白酶K是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中穩定,還具有降解天然蛋白質的能力,因而它應用很廣泛,包括制備脈沖電泳的染色體DNA,蛋白質印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作濃度是50—100μg/ml。在較廣的pH范圍內(pH4-12.5)均有活性。推薦反應緩沖液:50mMTris-HCl(pH7.5),10mMCaCl2。蛋白酶K配制標準:20...
  • 五一活動:核酸染料申請免費試用裝

    2019-05-07 核酸染料號稱生物技術領域“食用鹽”,我們有太多的實驗會用到它!但是所有的科研人員在采購核酸染料時,總是在糾結安全性、靈敏度、穩定性以及價格等原因,這也是擁有強致癌性的EB(溴化乙錠)還沒有退出歷史舞臺的原因。那有沒有一款既能保證實驗安全,又能擁有高靈敏度、強穩定性,還價格便宜的核酸染料了?值此關鍵時刻,上海李記生物研制的gelred/gelgreen閃亮登場。這是一種款以花箐素為原料的油性大分子,對人體無害,可替代EB(溴化乙錠)和goldview(吖啶橙)。易用性:可*替代...
  • 蛋白酶K跟蛋白酶的區別在哪里?

    2019-04-04 蛋白酶K主要應用于基因檢測中基因抽取,是檢測試劑盒生產的重要原料,蛋白酶K產品由于在尿素和SDS中仍然具有降解天然蛋白質的能力,因而被廣泛應用于制備脈沖電泳的染色體DNA,以及去除DNA和RNA中的核酸酶。現有基因抽提及檢測試劑盒中均需配備該酶。蛋白酶K跟蛋白酶有什么區別:蛋白酶K廣泛應用于分子生物學,藥理學等科研方面.一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關的絲氨酸蛋白酶,具有很高的比活性.一般儲存在-20°C,避光防潮密閉干燥。蛋白酶是所有能夠催化分解蛋白質的酶類的統稱,而蛋白酶...
  • 線粒體染色試劑盒的知識點有必要和大家說說

    2018-12-22 線粒體染色試劑盒的固定和透化,染色結束后,利用培養液或緩沖液清洗細胞。小心吸走清洗液,換用新鮮配制且預熱的含2-4%甲醛的緩沖液或培養液進行細胞固定。清洗細胞:吸除固定液,用適當緩沖液沖洗細胞數次。細胞透化(可選)可將已固定的細胞直接加入含有去污劑如TritonX-100的緩沖液中孵育。透化結束后,用緩沖液清洗細胞即可進行后續ICC實驗。一般用含0.2%TritonX-100的PBS孵育細胞10分鐘可以達到良好的透化效果。還可利用預冷的丙酮透化5分鐘,之后用PBS清洗細胞。經...
  • 注意!使用ecL化學發光液一定要明白這幾點

    2018-11-22 ecL化學發光液的使用方法,執行常規SDS-PAGE、轉膜、洗膜。注意用HRP標記lgG或用一抗-鏈親和素-生物素-HRP夾法。推薦將一抗濃度稀釋到0.5ug/ml(0.05~1ug/ml均可)將二抗濃度稀釋到0.02ug/mL(0.005~0.04ug/mL均可)后1次洗膜的同時,新鮮配制發光工作液:根據用量將兩種組份按1:1比例混合均勻,備用。注:1)短時間暴露于日光燈下不會損害該工作液,但為獲得佳結果,將此工作液保存在棕色瓶中,避免暴露于任何強光。取A液和B液一定要用不...
  • 高保真DNA聚合酶原來是這樣的

    2018-11-08 高保真DNA聚合酶的保真性:保真性是Taq酶的52倍,Pfu酶的6倍。*的擴增能力:簡單模板可擴增20kb,復雜模板可輕松擴增10kb。*的靈敏度:模板親和力強,極微量的模板也可擴增。風一樣的擴增速度:延伸時間極短,擴增速度可達15sec/kb。廣泛的模板適應性:適用于基因組DNA和cDNA等復雜模板的擴增。在PCR實驗中使用適當的聚合酶將確保佳的產量和特異性,目前市場上聚合酶甚多,如何選擇,有時還真是個難題。廠家一般都會提供一個選擇指南,列出每個產品的特異性、保真度、產量等...
  • 高保真DNA聚合酶為何廣受大眾的喜愛?

    2018-09-20 高保真DNA聚合酶的保真性,極為出色的保真度,比Taq酶高50倍。可靠性,高特異性和產量,且優化極少。覆蓋度,各種擴增子上的性能(從高AT到高GC)速度,短的延伸時間。擴增子長度–20kb簡單模板和10kb復雜模板的可靠擴增。為此,NEB推出了Q5。據稱,這種高保真DNA聚合酶的保真度比普通的Taq酶高50倍,導致擴增產物的錯誤率極低。為什么會這么高,這是因為聚合酶與Sso7dDNA結合結構域融合,從而改善了保真度、速度和性能可靠性。高保真DNA聚合酶除具有對引物,末端不配對...
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