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  • 蛋白酶K的配制標準及保存方法

    2020-10-15 蛋白酶K廣泛應用于分子生物學,藥理學等科研方面.一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關的絲氨酸蛋白酶,具有很高的比活性.一般儲存在-20°C,避光防潮密閉干燥。蛋白酶K主要應用于基因檢測中基因抽取,是檢測試劑盒生產的重要原料,蛋白酶K產品由于在尿素和SDS中仍然具有降解天然蛋白質的能力,因而被廣泛應用于制備脈沖電泳的染色體DNA,以及去除DNA和RNA中的核酸酶。現有基因抽提及檢測試劑盒中均需配備該酶。蛋白酶K配制標準:20mg/ml蛋白酶K配制標準(proteinaseK):將2...
  • 使用膠原酶要注意以下幾點

    2020-08-22 膠原酶(collagenase)是從溶組織梭狀細胞芽孢桿菌提取制備的,主要水解結締組織中膠原蛋白成分。當擬消化的組織較硬,內含較多結締組織或膠原成分時,用胰蛋白酶解離細胞的效果較差,這時可采用膠原酶解離細胞法。膠原酶僅對細胞間質有消化作用而對上皮細胞影響不大。因此適于消化分離纖維性組織、上皮及癌組織,可使上皮細胞與膠原成分分離而不受損害。常用劑量為zui終濃度200U/ml(約為1mg/mL)或0.03%~0.3%。膠原酶分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝細胞膠原酶,要根據所要分...
  • 牛血清白蛋白的主要成分有哪些?

    2020-03-18 牛血清白蛋白(BSA),是牛血清中的一種球蛋白,包含BSA結構含607個氨基酸殘基,分子量為66.446kDa,等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用。牛血清白蛋白的主要成分有哪些?1、蛋白質是牛血清中主要成份。除包括可攜帶金屬離子、脂肪酸和自身是激素類蛋白外主要還有白蛋白,球蛋白。纖維粘連素細胞促進細胞附著。α2巨球蛋白抑制胰蛋白酶的作用。胎牛血清中含胎球蛋白促細胞附著。轉鐵蛋白能結合鐵離子,減少其毒性和被細胞利用。2、多肽血小板促生長因子能促細胞分裂,是多肽...
  • 常用的細胞凋亡的檢測方法有哪些?

    2019-12-17 細胞凋亡與壞死是兩種*不同的細胞凋亡形式,根據死亡細胞在形態學、生物化學和分子生物學上的差別,可以將二者區別開來。細胞凋亡的檢測方法有很多,下面介紹幾種常用的測定方法。根據凋亡細胞固有的形態特征,人們已經設計了許多不同的細胞凋亡形態學檢測方法。1光學顯微鏡和倒置顯微鏡(1)未染色細胞:凋亡細胞的體積變小、變形,細胞膜完整但出現發泡現象,細胞凋亡晚期可見凋亡小體。貼壁細胞出現皺縮、變圓、脫落。(2)染色細胞:常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化,核膜裂解、染...
  • 胎牛血清在生理學領域的應用

    2019-09-03 生理學領域是ThermoScientificHyclone的胎牛血清產品應用多的領域。一些科研工作者利用該公司的胎牛血清來研究細胞內GDPD5在甘油磷酸膽堿(GPC)的滲透調節過程中的作用,反式作用位點連接的AP-1元件對BRCA1轉錄的影響,17beta-E2對線粒體相關的錳超氧化物歧化酶(MnSOD)表達及活性的影響,多肽納米纖維骨架的自裝配對傷口愈合的加速作用,PM膽固醇對PIP2調節的細胞骨架結構的影響,TRBP對PACT激活的調控作用,人角膜基質纖維母細胞及肌成纖維...
  • 胎牛血清應用在哺乳動物細胞培養中

    2019-07-28 胎牛血清中含有蛋白質、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白質主要為白蛋白和球蛋白。氨基酸有多種,是細胞合成蛋白質的基本成分,其中有些氨基酸動物細胞本身不能合成(稱為必需氨基酸),必須由培養液提供。血清激素有胰島素、生長激素等及多種生長因子(如表皮生長因子、成纖維細胞生長因子、類胰島素生長因子等);血清還含有多種未知的促細胞生長因子、促貼附因子及其他活性物質,能促進細胞的生長、增殖和貼附。胎牛血清在動物細胞培養中起著多方面的作用可以概括為:①提供細胞生存和增殖所必需的生長調節因子。...
  • 為什么人們一定要用胎牛血清而不用新生牛血清呢?

    2019-07-05 胎牛血清是實驗室里細胞培養中用量大的天然培養基,因為胎牛從未接觸過外界,而使得其血清中所含的抗體和補體幾乎沒有對細胞有害的成分。并且高質量的胎牛血清含有的豐富營養成分可以滿足細胞生長需求,在應用于動物細胞的體外培養中發揮出重要作用。那么為什么人們一定要用胎牛血清而不用新生牛血清呢?想知道兩者之間都有哪些區別不妨看看以下小編歸納的幾點內容:胎牛血清與新生牛血清的三大區別1、來源不同胎牛顧名思義就是指還在母牛身體里的小牛,所以胎牛血清的采集工作,便是先從懷孕中的母牛身體里取出胎牛...
  • 線粒體染色試劑盒的分離原理

    2019-05-28 線粒體染色試劑盒用于動物細胞或組織中分離出完整而純化的線粒體。適合用于動物軟組織和硬組織及培養細胞的線粒體的制備。其制備物產量高,可用于細胞凋亡、信號傳遞、代謝和蛋白組織學研究。產品不含污染性蛋白酶和核酶,即到既用性能穩定。核線粒體的分離原理:1.通過機械方法破裂細胞。2.通過低速差速離心去除殘渣碎屑和巨大細胞。3.通過高速差速離心獲得線粒體。使用注意事項:1.全程低溫操作,將樣品管放在冰水浴而不是碎冰中。2.快速、微量制備比大規模制備操作更方便快捷,因而更容易獲得完整的線粒...
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