凋亡雙染實驗常見問題及解決方案:熒光補償、背景干擾與假陽性
2025-07-15
凋亡雙染(AnnexinV-FITC/PI)是檢測細胞凋亡的經典方法,廣泛應用于腫瘤研究、藥物篩選、免疫學等領域。然而,實驗過程中常遇到熒光補償不當、背景干擾高、假陽性等問題,影響數據準確性。本文系統分析這些問題的成因,并提供優化方案,幫助研究者獲得更可靠的實驗結果。1.熒光補償問題1.1問題表現熒光信號重疊:FITC(綠色)和PI(紅色)的發射光譜部分重疊,導致流式細胞儀檢測時信號串擾。補償不足或過度:補償設置不當會導致假陽性或假陰性結果,如早期凋亡細胞(AnnexinV+...