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產(chǎn)品中心細胞生物學報告基因Firefly & Renilla 雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒
產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品貨號 產(chǎn)品規(guī)格 原價 AC19L021 100T 980 ......
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品描述
螢火蟲螢光素酶是一種分子量約為61 kD 的蛋白，在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下，可以催化Luciferin 氧化成Oxyluciferin，在Luciferin 氧化的過程中，并伴隨生物發(fā)光(Bioluminescence)。海腎螢光素酶是一種分子量約為36 kD的蛋白，在氧氣存在的條件下，可以催化Coelenterazine 氧化成Coelenteramide，在Coelenterazine 氧化的過程中也伴隨生物發(fā)光。生物發(fā)光是化學發(fā)光的一種形式，通過化學反應釋放光能，可以通過化學發(fā)光儀(Luminometer)或液閃測定儀進行測定。
在 DLR 檢測中，螢火蟲（Firefly）螢光素酶和海腎（Renilla）螢光素酶的活性可在單個樣品中依次檢測。先是先以螢光素(Luciferin)為底物來檢測螢火蟲螢光素酶(Firefly Luciferase)，后以腸腔素(Coelenterazine)為底物來檢測海腎螢光素酶(Renilla Luciferase)，并在后續(xù)加入海腎螢光素酶底物時，同時加入抑制螢火蟲螢光素酶催化Luciferin發(fā)光的物質(zhì)，使后續(xù)檢測僅僅檢測到海腎螢光素酶的活性，實現(xiàn)雙螢光素酶報告基因檢測。通過螢光素酶和其底物這一生物發(fā)光體系，可以非常靈敏、高效地檢測基因的表達。通常把感興趣基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件或5' 啟動子區(qū)克隆在Luciferase 的上游，或把3'-UTR 區(qū)克隆在Luciferase 的下游等，構(gòu)建成報告基因(Reporter Gene)質(zhì)粒，然后轉(zhuǎn)染細胞，用適當藥物等處理細胞后裂解細胞，測定螢光素酶活性。通過螢光素酶活性的高低來判斷藥物處理等對目的基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。 Renilla Luciferase 相對更多地被用作轉(zhuǎn)染效率的內(nèi)參，以消除細胞數(shù)量和轉(zhuǎn)染效率的差異。
李記生物的Firefly & Renilla雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒，具有檢測迅速、靈敏度高、檢測范圍廣，無細胞內(nèi)源活性干擾等特點。
訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
Firefly & Renilla雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒 | AC19L021 | 100T |
Firefly & Renilla雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒 | AC19L022 | 10*100T |
產(chǎn)品組分
組分 | AC19L021 | AC19L022 |
A. 5× Passive Luciferase Lysis Buffer | 10mL | 10*10mL |
B. Firefly Luciferase Assay Buffer | 10mL | 10*10mL |
C. D-Luciferin | 2mg | 10*2mg |
D. Renilla Luciferase Assay Buffer | 10mL | 10*10mL |
E. 50× Coelenterazine | 200µL | 10*200µL |
運輸與保存
藍冰運輸。-20℃保存，有效期12個月。
【注】：組分C建議預先使用組分B配制為2 mg/mL儲液，組分B、組分D及配制為儲液的組分C，根據(jù)實驗需求進行小批量分裝。所有檢測工作液建議現(xiàn)配現(xiàn)用，避免反復凍融。
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本產(chǎn)品于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
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