產品描述

Cyvita MSC細胞凍存液是一種即用型無血清細胞凍存液，采用化學成分明確的無動物源配方，含10%DMSO及多種細胞營養成分，可顯著提高細胞凍存復蘇存活率。該產品對各種類型的間充質干細胞（MSC）具有非常好的效果，同時適用于多種動物細胞系（如293T、CHO）、免疫細胞（如NK、T、THP1）及其他類型干細胞（如iPSC）的凍存，具有安全性高（無血清污染風險）、凍存效果穩定、操作簡便等特點，支持-80℃短期儲存（6個月）及非程序化凍存，是替代傳統血清凍存液的理想選擇。

訂購信息

運輸與保存

常溫運輸。4℃保存，有效期18個月。

使用方法

細胞凍存步驟（如圖1）：

1.         使用常規方法收集對數期的貼壁細胞或懸浮細胞，并計數，確認所需凍存的細胞數量。

2.         將即凍存細胞收集于離心管中，1000 rpm 離心 5 min左右，收集細胞沉淀，并棄掉上清液。

3.         加入適量PBS重懸細胞沉淀，1000 rpm 離心 5 min左右，收集細胞沉淀，并棄掉上清液。注意：清  洗步驟，可清洗掉殘留消化液等。

4.         加入適量的凍存液至離心管中，最后的細胞保存濃度為 1×10⁶至 5×10⁶/mL，輕柔混勻細胞，形成細胞混合液。

5.         將細胞混合液按 1~1.5 mL 每管分裝于凍存管中。

6.         將凍存管直接置于 -80℃ 保存，如需長期凍存，第二天轉移至液氮里保存。

圖1

細胞復蘇步驟（如圖2）：

1.         先準備體積為凍存液體積9倍的培養基，預溫至室溫或37℃。

2.         從-80℃取出凍存細胞，立即放入37℃ 水浴鍋快速解凍，期間不斷搖晃。待剩余1粒米大小的冰塊時，迅速移出水浴。

3.         用 75% 酒精擦拭凍存管管壁，將細胞懸液轉移至15 ml離心管。

4.         按1:9比例加入預溫（室溫或37℃）的新鮮培養基，混勻，1000 rpm，5 min離心，棄上清，獲取細胞沉淀。注：稀釋DMSO，防止溫度上升后DMSO產生的細胞毒性；稀釋后離心棄上清，殘留的DMSO更少

5.         加入適量預溫的新鮮細胞培養基，輕柔混勻，并將混合液轉移至培養容器，觀察細胞狀態正常后，進行后續細胞培養工作。

圖2

注意事項

1.     本產品于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領域。

2.     細胞在加入凍存液分裝后，應減少在外存放時間，盡快移入到 -80℃ 超低溫冰箱。

3.     對一些難凍存細胞進行凍存時，建議在使用前對所凍存的胞進行1周以上的試驗性細胞冷凍保存測試，摸索好凍存條件和確認性能后再進行正式凍存。

4.     本產品含有10% DMSO，部分對 DMSO 敏感的細胞，建議對其進行至少1周的本產品試驗性的細胞凍存培養測試，摸索好凍存條件和確認性能后再正式凍存。

5.     細胞復蘇時，取出的凍存細胞，應立即放在37℃水浴輕搖，接近融化時取出，避免懸液升溫產生DMSO毒性，迅速解凍有助于提高復蘇效率。

6.     建議復蘇操作將復蘇懸液1:9稀釋后離心收集，優點：稀釋DMSO，防止溫度上升后DMSO產生的細胞毒性；稀釋后離心棄上清，殘留的DMSO更少。

7.     對于較為脆弱或珍貴的細胞，建議在-80°C的存放過夜后，應轉移至液氮罐中長期保存。

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