產品描述

DAPI是一種常用于細胞核染色的藍色熒光染料，優先結合雙鏈DNA，尤其是與小溝中的AT區域結合。此外，DAPI亦可結合RNA，但結合模式不同。與DNA復合物相比，DAPI/RNA復合物的熒光發射波長較長（約500 nm），而DAPI/DNA復合物的發射波長為約460 nm。

在多色熒光染色技術中，DAPI作為常用的核染色劑，因其藍色熒光能夠與綠色、黃色或紅色熒光形成鮮明對比。DAPI具有較高的細胞核特異性，幾乎不染色細胞質。本染液濃度為3 μM，非無菌制劑。

訂購信息

運輸與保存

藍冰運輸。-20℃避光保存，有效期 12個月。

使用方法

1.     貼壁細胞的復染

1.1  樣品準備

1.1.1      使用適當的固定劑固定貼壁細胞樣品，確保細胞形態保持完整。固定后，使用DAPI染料進行細胞核核染色。

1.2  復染流程

1.2.1      用PBS短暫平衡樣品；

1.2.2      加入適量的DAPI染液，確保覆蓋細胞，孵育3-5min；

1.2.3      用PBS漂洗樣品數次，輕輕吸去多余液體，避免細胞干燥；

1.2.4      在配有合適濾片的熒光顯微鏡下觀察樣品。

2.     懸浮細胞的復染

2.1  樣品準備

2.2.1 收集懸浮細胞2×105~1×106個細胞，通過離心收集沉淀，棄去上清；

2.2.2 輕彈試管，使沉淀在剩余的液體中重懸，在加入1mL PBS；

2.2.3 將細胞懸液緩慢的加入4mL乙醇中，同時以最大的速度渦旋。將含有細胞的乙醇在-20°C放置5-15min；

2.2.4 通過離心，使細胞沉淀，棄上清；

2.2.5 輕彈試管，使沉淀松散，在加入5ml PBS。

2.2  復染流程

2.2.1 離心使細胞沉淀，棄上清，輕彈試管，使沉淀松散，加入2~3mL DAPI染液；

2.2.2 室溫下孵育15min；

2.2.3如果使用熒光顯微鏡觀察細胞，將樣品離心后，棄上清，用新鮮的緩沖液重懸沉淀。在顯微鏡載片上滴加一滴細胞懸液，加蓋片后觀察。

注意事項

1． 本產品僅限于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領域。

2． 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

3． 使用觀察藍色熒光的熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡。

4． 自備PBS，固定液及抗熒光淬滅封片液。

5． 第一次使用本試劑盒時建議先取1-2個樣品做預實驗。

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